EFFECTS OF COMPLEX OF ß-CYCLODEXTRIN WITH LEVOFLOXACIN ON LETHAL QUALITIES OF RUSSIAN AND SIBERIAN STURGEON HYBRID IN REGULATED CONDITIONS
Abstract and keywords
Abstract (English):
When producing aquaculture products in conditions of increased planting densities of aquatic organisms, it is not always possible to avoid various diseases and injuries. The use of therapeutic baths and feeds often does not al-low to achieve a positive effect. Therefore, the use of cyclodextrin nanosponge with therapeutic and prophylactic agents included in their cavity will allow a targeted effect on the bioavailability of substances and the formation of productive indicators of hydrobionts already since early postnatal ontogenesis. All this will contribute to the improvement of industrial technology for growing table and valuable fish species, characterized by higher survival and productivity. The antibiotic levofloxacin, a broad-spectrum antimicrobial bactericidal agent of the fluoroquinolone group, was chosen as a therapeutic EDN agent. There is presented information on the effect of the complex of β-cyclodextrin with levofloxacin on the lethal qualities of a Russian and Siberian sturgeon hybrid of different live weight. The influence of this complex on the pre-slaughter mass, the mass of individual internal organs, the fatness coefficient, the indices of the internal organs of hybrid individuals was studied according to two stages of the experiment performed in the laboratory “Progressive Biotechnologies in Aquaculture” of Vavilov University. The results of the control slaughter demonstrate the highest values for the indicators in individuals of the 2nd experimental group treated with the main diet at the first stage of the complex chitosan-β-cyclodextrin in various dosages of levofloxacin. Its results exceeded the control in the muscle mass, fatness coefficient, muscle tissue index, respectively. Thus, there was no negative effect of the β-cyclodextrin complex with an antibiotic on the functional state of internal organs and tissues of fish. The results obtained expand the information about the cultivation of sturgeon fish in industrial conditions using cyclodextrin nanosponge.

Keywords:
hybrid, β-cyclodextrin, lethal qualities, indices of internal organs, fatness coefficient
Text
Publication text (PDF): Read Download

Введение

В последнее время бурное развитие пресноводной аквакультуры привело к проявлению как многих новых, так и известных ранее заболеваний рыб, поэтому избежать применения антибиотиков, антигельминтиков и других препаратов невозможно [1]. Проводятся разнообразные иссле  дования в части поиска новых лекарственных и профилактических средств, совершенствуется методика их введения в организм гидробионтов, интенсивными темпами развиваются нанотехнологии в различных направлениях промышленности и медицины. Одним из таких направлений является использование продуктов гидролиза крахмала – циклодекстринов – для доставки лечебных препаратов в организм благодаря свойствам биоразлагаемости и нетоксичности [2].

Циклодекстрины (α-, β- и γ-) представляют собой сформированные циклические олигосахариды с 6, 7 или 8 остатками D-глюкопиранозы, связанные α-1–4-гликозидами. Популярность циклодекстринов обусловлена их строением и наличием гидрофобной полости, которая может образовывать соединения различного типа с разнообразными органическими субстратами. Циклодекстрины обладают такими ценными качествами, как растворимость в воде, органических растворителях, что позволяет им образовывать вещества совершенно нового типа путем направленного изменения их структуры. В связи с этим использование наногубки в виде субстрата для лекарственных и профилактических средств является актуальным направлением исследований.

Гибрид русского и сибирского осетров, в сравнении с родительскими видами, отличается хорошим темпом роста и обладает наибольшим коэффициентом массонакопления [3, 4]. В естественных условиях эта рыба к 3–4 годам набирает товарную массу от 1,3 до 3,0 кг. Также к числу преимуществ данного гибрида относится высокая биологическая пластичность, оптимальные качества экстерьера и недолгий межнерестовый интервал.

В качестве антимикробного препарата представляет интерес левофлоксацин, который активен в отношении большинства возбудителей бактериальных инфекций. Он быстро и практически полностью всасывается и обладает высокой биодоступностью [5].

Цель работы заключалась в изучении воздействия комплексов β-циклодекстрина с левофлоксацином на убойные качества гибрида русского и сибирского осетра, выращенного в индустриальных условиях.

 

Материал и методика исследований

Исследования проводились в научно-исследовательской лаборатории «Прогрессивные биотехнологии в аквакультуре» на базе кафедры «Генетика, разведение, кормление животных и аквакультура» Вавиловского университета. В эксперименте были использованы комплексы β-циклодекстринов, заполненные антимикробным препаратом с активным действующим веществом левофлоксацин. Исследуемые комплексы β-циклодекстринов были синтезированы и предоставлены кафедрой «Химическая энзимология» Московского государственного университета им. М. В. Ломоносова.

В процессе опыта определяли убойные показатели и функциональное состояние внутренних органов осетровых рыб.

По принципу групп-аналогов на каждый из 2-х этапов эксперимента были сформированы по 4 подопытные группы из 40 гибридных особей русского и сибирского осетра, на первом этапе эксперимента – со средней массой 110,0 г, на втором этапе – со средней массой 405,0 г. Их разместили по 10 экземпляров в 4 аквариума объемом 250 л каждый (табл. 1).

 

 

Таблица 1

Table 1

Схема опыта

Scheme of experiment

Группа

Состояние рыбы

Тип кормления

Первый этап

Контрольная

Здоровая

ОР*

1-я опытная

Повреждена и получает лечение

ОР + комплекс хитозан-β-циклодекстрин
с 23 % левофлоксацина

2-я опытная

Здоровая, профилактика

ОР + комплекс хитозан-β-циклодекстрин – эвгенол с 15 % левофлоксацина

3-я опытная

Повреждена, лечение не получает

ОР

Второй этап

Контрольная

Здоровая

ОР

1-я опытная

Повреждена и получает лечение

ОР + комплекс силикагель-хитозан
β-циклодекстрин с 16 % левофлоксацина

2-я опытная

Здоровая, профилактика

ОР + комплекс силикагель-β-циклодекстрин
с 5 % левофлоксацина

3-я опытная

Повреждена, лечение не получает

ОР

 

* ОР – основной рацион.

 

 

Особи контрольной и третьей групп изучаемый комплекс не получали. Две опытные группы получали корм с комплексом хитозан-β-циклодекстрин в различной дозировке левофлоксацина (первая – комплекс хитозан-β-циклодекстрин с 23 % левофлоксацина, вторая – комплекс хитозан-β-циклодекстрин-эвгенол с 15 % левофлоксацина). Дозы ввода действующего вещества были следующими: первая опытная группа поврежденных особей получала левофлоксацин в количестве 4,1 мг на 1 кг массы рыбы для лечения в течение 5 сут; вторая опытная группа здоровой рыбы – 0,96 мг на 1 кг массы рыбы для профилактических целей в течение 10 сут. Исследуемые вещества вносили в корм и интенсивно перемешивали в течение 4–5 мин для равномерного распределения.

На втором этапе контрольная группа здоровых особей, а также третья опытная группа поврежденной рыбы изучаемое вещество не получали. Две опытные группы получали корм с комплексами β-циклодекстринов и различной дозировкой левофлоксацина (первая – комплекс силикагель-хитозан β-циклодекстрин с 16 % левофлоксацина, вторая – комплекс силикагель β-циклодекстрин с 5 % левофлоксацина). Дозы ввода действующего вещества были следующими: первая опытная группа поврежденных особей получала левофлоксацин в количестве 0,99 мг на 1 кг массы рыбы для лечения в течение 5 суток подряд; вторая опытная группа здоровой рыбы – 0,35 мг на 1 кг массы рыбы для профилактических целей в течение 10 сут.

По результатам выращивания выполняли контрольный убой 3 особей примерно равных по массе из каждой группы согласно общепринятым методикам [6].

Индексы органов рассчитывали по формуле

  

где Wo – масса органа, г; W – масса рыбы, г.

Полученные экспериментальные данные подвергнуты биометрической обработке общепринятыми методами, с применением программно-вычислительного пакета MS Excel 2007 [7]. При обработке использовали среднюю арифметическую, ошибку средней арифметической, среднее квадратическое отклонение, выборку. Достоверность различий выборок оценивали по критерию Стьюдента.

 

Результаты исследований и их обсуждение

Для контрольного убоя были отобраны по 3 особи из каждой подопытной группы с примерно одинаковой массой (107–110 г) на 6- и 11-е сут.

При внешнем осмотре рыбы картина в опытных и контрольной группах существенных отличий не имела. Осетры были гладкие и блестящие. Особей взвесили, измерили биологическую длину. Визуально определили эпителиальный процесс рубцевания травмированной области под действием антибиотика.

Данные полученные в ходе убоя особей на первом этапе исследований представлены в табл. 2.

 

 

 

Таблица 2

Table 2

Результаты контрольного убоя рыбы (I этап)

Results of the fish control slaughter (Stage I)

Показатель

Группа

контрольная

1-я опытная

2-я опытная

3-я опытная

6-е сут эксперимента

Предубойная масса, г

107,33 ± 5,76

110,33 ± 5,12

107,33 ± 2,97

108,33 ± 3,96

Масса снятой кожи, г

27,33 ± 0,41

26,67 ± 2,27

25,16 ± 2,23

26,58 ± 4,59

Масса головы и плавников, г

35,67 ± 2,68

38,21 ± 1,96

36,12 ± 2,23

36,51 ± 2,76

Масса хрящевой ткани, г

10,44 ± 0,85

9,98 ± 0,43

9,17 ± 0,35

9,20 ± 1,04

Масса мышечной ткани, г

19,33 ± 1,77

19,67 ± 2,86

19,90 ± 2,27

19,51 ± 3,50

Масса сердечной мышцы, г

0,22 ± 0,05

0,19 ± 0,04

0,20 ± 0,03

0,22 ± 0,05

Масса печени, г

2,20 ± 0,06

2,50 ± 0,04**

2,31 ± 0,04

2,14 ± 0,04

Масса ЖКТ, г

6,02 ± 0,54

7,10 ± 0,55

8,18 ± 0,85

7,79 ± 0,57

Масса остальных внутренних органов, г

6,12 ± 0,73

6,01 ± 1,26

6,29 ± 0,71

6,38 ± 0,69

Длина рыбы, см

34,43 ± 1,22

34,43 ± 2,40

34,22 ± 0,71

34,30 ± 1,19

Коэффициент упитанности по Фультону

0,263

0,270

0,268

0,268

11-е сут эксперимента

Предубойная масса, г

130,00 ± 8,12

120,33 ± 8,84

135,00 ± 4,90

118,33 ± 7,88

Масса снятой кожи, г

32,96 ± 6,80

25,58 ± 2,60

31,08 ± 0,62

24,00 ± 5,61

Масса головы и плавников, г

36,80 ± 6,34

35,25 ± 3,45

36,33 ± 4,96

39,00 ± 3,68

Масса хрящевой ткани, г

12,51 ± 1,78

10,09 ± 1,83

12,85 ± 1,33

10,00 ± 0,71

Масса мышечной ткани, г

22,43 ± 3,83

25,58 ± 1,82

29,94 ± 1,10

21,40 ± 1,65

Масса сердечной мышцы, г

0,48 ± 0,02

0,37 ± 0,01*

0,35 ± 0,03*

0,40 ± 0,03

Масса печени, г

5,58 ± 0,04

5,64 ± 0,05

5,21 ± 0,06**

5,56 ± 0,04

Масса ЖКТ, г

11,55 ± 0,78

11,57 ± 0,06

12,93 ± 0,85

11,15 ± 0,71

Масса остальных внутренних органов, г

7,69 ± 0,81

6,25 ± 0,74

6,31 ± 0,42

6,82 ± 0,23

Длина рыбы, см

35,10 ± 0,47

34,83 ± 1,27

34,33 ± 2,27

34,70 ± 1,62

Коэффициент упитанности по Фультону

0,301

0,285

0,334

0,283

 

* P < 0,01; ** р < 0,001.

 

 

Средняя масса до убоя на 6-е сут эксперимента была практически одинаковой во всех подопытных группах и в среднем составила 108,33 г.

Средняя масса мышечной ткани по группам была около 19,6 г.

На 11-е сут первого этапа опыта предубойная масса превышала первоначальную во всех группах и в среднем ее величина составила 125,92 г. По массе мышечной ткани лидировали особи 2-й опытной группы, превышающие контрольную на 7,51 г, на последнем месте были осетры из 3-й опытной группы, отстающие от контрольной группы на 1,03 г, что вполне объяснимо, т. к. предубойная масса, именно в этой группе, также была минимальной – 118,33 г. Максимальный коэффициент упитанности по Фультону также был отмечен у рыб из 2-й опытной группы, он превысил на 0,033 аналогичный показатель у особей из контрольной группы.

Соматические индексы внутренних органов отражены в табл. 3. В зависимости от вида и условий выращивания размеры внутренних органов у различных рыб могут существенно отличаться. Размеры сердца зависят от плавательной активности и являются показателем энергетического потенциала [8]. На размер печени влияют питание, обмен веществ и физиологическое состояние особи.

При вскрытии рыб печень у большинства особей из подопытных групп была от светлого до темно-бордового цвета, упругой консистенции, средней массой 2,09 г в начале эксперимента и 5,50 г в конце. На 6-е сут отмечено достоверное увеличение печени в 1-й опытной группе на 16,3 % (0,001), что коррелирует с временным увеличением некоторых показателей крови под влиянием антибиотика. Но к 11-м сут ее масса в этой группе оказалась уже на уровне контроля (табл. 3).

 

 

Таблица 3

Table 3

Индекс внутренних органов (I этап)

Index of internal organs (Stage I)

Показатель

Индекс органов по группам

контрольная

1-я опытная

2-я опытная

3-я опытная

6-е сут эксперимента

Кожа

25,46

24,17

23,44

24,54

Голова, плавники

33,23

34,63

33,65

33,70

Хрящевая ткань

9,73

9,05

8,54

8,49

Мышечная ткань

18,01

18,74

18,54

18,01

Сердце

0,21

0,17

0,19

0,20

Печень

2,05

2,27

2,15

1,98

Желудочно-кишечный тракт

5,61

8,16

7,62

7,19

11-е сут эксперимента

Кожа

25,35

21,26

23,02

20,28

Голова, плавники

28,31

29,29

26,91

32,96

Хрящевая ткань

9,62

8,39

9,52

8,45

Мышечная ткань

17,25

21,26

22,18

18,09

Сердце

0,37

0,31

0,26

0,34

Печень

4,29

4,69

3,86

4,70

Желудочно-кишечный тракт

8,89

9,62

9,58

9,42

 

 

На 6-е сут эксперимента по индексу мышечной ткани выделялись особи 1-й опытной группы – 18,74, индекс сердца был выше у рыб контрольной группы – 0,21, а гепатосоматический индекс печени у осетров из 1-й опытной группы был 2,27. К концу опытного периода индекс мышечной ткани стал максимальным у рыб 2-й опытной группы – 22,18, преобладание индекса сердца так и сохранилось у осетров контрольной группы, а самый высокий гепатосоматический индекс печени был зафиксирован к концу опыта у особей из 3-й опытной группы 4,70.

На втором этапе эксперимента для контрольного убоя были отобраны рыбы с примерно одинаковой массой (около 393 г) на 6-е сут.

У исследованных особей не выявлено внешних признаков патологических нарушений. Некрозных проявлений, кровоизлияний на кожном покрове не обнаружено. При визуальном осмотре внутренних органов можно отметить, что они были в хорошем состоянии, так, например, печень имела четкие контуры, была яркого насыщенного коричневого цвета, блестящая, в среднем массой 14,19 г на 6-е сут. Сердце было сформированное, правильной конусообразной формы, розового цвета, без жировой ткани, средней массой 0,69 г.

Результаты контрольного убоя на втором этапе эксперимента представлены в табл. 4.

 

Таблица 4

Table 4

Результаты контрольного убоя рыбы (II этап)

Results of the fish control slaughter (Stage II)

Показатель

Группа

контрольная

1-я опытная

2-я опытная

3-я опытная

6-е сут эксперимента

Предубойная масса, г

393,67 ± 16,45

393,33 ± 12,49

392,33 ± 15,53

393,00 ± 7,81

Масса снятой кожи, г

73,33 ± 1,88

70,33 ± 2,59

71,15 ± 4,08

72,33 ± 3,13

Масса головы и плавников, г

133,67 ± 2,89

134,00 ± 1,84

136,00 ± 1,87

131,67 ± 2,18

Масса хрящевой ткани, г

35,67 ± 4,19

32,00 ± 2,28

36,67 ± 2,94

33,67 ± 2,23

Масса мышечной ткани, г

60,12 ± 6,06

69,59 ± 3,68

58,66 ± 4,59

65,99 ± 2,69

Масса сердечной мышцы, г

0,70 ± 0,03

0,69 ± 0,04

0,63 ± 0,05

0,72 ± 0,06

Масса печени, г

14,28 ± 0,11

13,97 ± 0,08

14,50 ± 0,08

14,00 ± 0,11

Масса ЖКТ, г

48,88 ± 0,67

46,75 ± 0,69

49,05 ± 0,56

47,62 ± 0,61

Масса остальных внутренних органов, г

27,02 ± 4,59

26,00 ± 1,41

25,67 ± 2,94

27,00 ± 5,52

Длина рыбы, см

54,00 ± 2,55

53,50 ± 3,83

54,73 ± 0,33

54,00 ± 1,87

Коэффициент упитанности по Фультону

0,250

0,257

0,239

0,250

 

Окончание табл. 4

Ending of the table 4

Показатель

Группа

контрольная

1-я опытная

2-я опытная

3-я опытная

11-е сут эксперимента

Предубойная масса, г

556,00 ± 8,75

548,33 ± 7,89

558,33 ± 10,42

406,67 ± 7,69

Масса снятой кожи, г

92,33 ± 3,54

93,00 ± 1,91

97,33 ± 2,87

73,33 ± 2,16*

Масса головы и плавников, г

162,67 ± 1,42

163,67 ± 2,24

162,00 ± 2,20

130,33 ± 2,88

Масса хрящевой ткани, г

38,33 ± 1,99

37,33 ± 3,49

38,67 ± 2,88

30,33 ± 3,90

Масса мышечной ткани, г

165,89 ± 3,42

167,31 ± 5,02

170,55 ± 4,08

100,30 ± 4,63

Масса сердечной мышцы, г

0,80 ± 0,05

0,84 ± 0,03

0,87 ± 0,04

0,74 ± 0,04

Масса печени, г

18,41 ± 0,12

18,06 ± 0,17

17,14 ± 0,13**

16,25 ± 0,11

Масса ЖКТ, г

48,59 ± 0,23

39,88 ± 0,32

42,72 ± 0,33

32,53 ± 0,36

Масса остальных внутренних органов, г

28,98 ± 1,66

28,24 ± 0,67

29,05 ± 1,25

22,86 ± 1,75

Длина рыбы, см

55,67 ± 2,86

54,67 ± 1,78

54,90 ± 2,55

54,17 ± 2,16

Коэффициент упитанности по Фультону

0,322

0,336

0,337

0,256

 

* Р < 0,01; ** р < 0,001.

 

 

На втором этапе эксперимента к его концу масса органов и тканей у рыб 3-й опытной группы отличалась от контрольных цифр, т. к. особи этой группы отставали в росте. По массе мышечной ткани на 6-е сут самое высокое значение отмечено у рыб 1-й опытной группы, превысившей контрольную группу на 9,47 г, на 11-е сут по этому показателю лидирует 2-я опытная группа, значения которого превышают контрольные цифры на 4,66 г. Максимальное значение коэффициента упитанности по Фультону на 6-е сут эксперимента отмечается в 1-й опытной группе – 0,257, к концу исследовательского периода он оказался выше во 2-й опытной группе – 0,337, что на 0,015 выше данного значения в контрольной группе.

Масса внутренних органов зависит от количества крови, содержащейся в тканях рыб. Распределение крови по различным органам неодинаковое.

Индексы внутренних органов объектов исследования приведены в табл. 5.

 

Таблица 5

Table 5

Индекс внутренних органов (II этап)

Index of internal organs (Stage II)

Показатель

Группа

контрольная

1-я опытная

2-я опытная

3-я опытная

6-е сут эксперимента

Кожа

18,63

17,88

18,14

18,41

Голова, плавники

33,96

34,07

34,67

33,50

Хрящевая ткань

9,06

8,14

9,35

8,57

Мышечная ткань

15,27

17,69

14,95

16,79

Сердце

0,18

0,18

0,16

0,18

Печень

3,63

3,55

3,70

3,56

Желудочно-кишечный тракт

12,42

11,89

12,50

12,12

11-е сут эксперимента

Кожа

16,61

16,96

17,43

18,03

Голова, плавники

29,26

29,85

29,02

32,05

Хрящевая ткань

6,89

6,81

6,93

7,46

Мышечная ткань

29,84

30,51

30,55

24,66

Сердце

0,14

0,15

0,16

0,18

Печень

3,31

3,29

3,07

4,00

Желудочно-кишечный тракт

8,74

7,27

7,65

8,00

 

 

На 6-е сут исследования индекс мышечной ткани рыб в группах был от 14,95 до 17,69, при этом максимальный отмечен у особей из 1-й опытной группы. Индекс сердца у осетров из трех групп был одинаковым, выделялись лишь рыбы из 2-й опытной группы с минимальным значением 0,16. Максимальный гепатосоматический индекс отмечен у особей 2-й опытной группы, он превысил аналогичный показатель в контрольной группе на 0,07.

На 11-е сут исследования индекс мышечной ткани увеличился во всех подопытных группах, однако наибольший был получен во 2-й опытной группе, превысивший контрольную группу на 0,71. По индексу сердца преимущество сохранилось за рыбами 3-й опытной группы – 0,18, что на 0,04 больше данного показателя в контрольной группе, у них же оказался и максимальный гепатосоматический индекс – 4,00, превысивший контроль на 0,69.

По результатам убоев наивысшие значения по ряду показателей имели особи 2-й опытной группы, превышающие контроль: по массе мышечной ткани на 7,51 и 4,66 г, по коэффициенту упитанности – на 0,033 и 0,015, по индексу мышечной ткани – на 4,93 и 0,71 соответственно.

 

Заключение

Таким образом, приведенный в работе материал позволяет сделать вывод о положительном влиянии комплексов β-циклодекстрина с левофлоксацином в профилактических дозах на органы, ткани и упитанность гибрида русского и сибирского осетра, выращенного в индустриальных условиях.

References

1. Mikulich E. L. Parazitologicheskaya ocenka rybnoy produkcii, importiruemoy v Respubliku Belarus' // Vestn. Vyat. GSHA. 2020. № 4 (6). S. 5.

2. Deygen I. M., Egorov A. M., Kudryashova E. V. Struktura i stabil'nost' kompleksov ftorhinolonov s gidroksipropil-β-ciklodekstrinom dlya sozdaniya novyh lekarstvennyh form protivotuberkuleznyh preparatov // Vestn. Mosk. un-ta. Ser. 2. Himiya. 2015. T. 56, № 6. S. 387-392.

3. Ponomarev S. V., Bakaneva Yu. M., Fedorovyh Yu. V. Akvakul'tura. SPb.: Lan', 2017. 440 s.

4. Filippova O. P., Zuevskiy S. E. Perspektivy vyraschivaniya gibrida russkogo osetra s sibirskim osetrom v Rossii // Strategiya 2020: Integracionnye processy obrazovaniya, nauki i biznesa kak osnova innovacionnogo razvitiya akvakul'tury v Rossii: sb. tr. Mezhdunar. nauch.-prakt. foruma. M.: Izd-vo MGUTU, 2009. S. 56-66.

5. Yakovlev V. P., Litovchenko K. V. Levofloksacin - novyy antimikrobnyy preparat gruppy ftorhinolonov // Infekciya i antimikrobnaya terapiya. 2001. T. 3, № 5. S. 132-140.

6. Romanov V. I., Petlina A. P., Babkina I. B. Metody issledovaniya presnovodnyh ryb Sibiri: ucheb. posobie. Tomsk: Izd-vo Tom. gos. un-ta, 2012. 252 s.

7. Lakin G. F. Biometriya. M.: Vyssh. shk., 1990. 352 s.

8. Kuricyn A. E., Efremov S. A., Makarova T. A. Morfofiziologicheskie harakteristiki raduzhnoy foreli (Oncorynchus mikiss Walbaum) i muksuna (Coregonus muksun (Pallas)) pri sadkovom vyraschivanii // Izv. TSHA. 2017. Vyp. 3. S. 84-94.


Login or Create
* Forgot password?