Россия
Россия
Россия
ВАК 03.02.2010 Гидробиология
ВАК 05.18.04 Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств
ВАК 05.18.17 Промышленное рыболовство
ВАК 06.04.2001 Рыбное хозяйство и аквакультура
УДК 63 Сельское хозяйство. Лесное хозяйство. Охота. Рыбное хозяйство
ГРНТИ 34.39 Физиология человека и животных
ГРНТИ 62.13 Биотехнологические процессы и аппараты
ГРНТИ 69.01 Общие вопросы рыбного хозяйства
ГРНТИ 69.25 Аквакультура. Рыбоводство
ГРНТИ 69.31 Промышленное рыболовство
ГРНТИ 69.51 Технология переработки сырья водного происхождения
ГРНТИ 87.19 Загрязнение и охрана вод суши, морей и океанов
Рассматривается опыт применения препарата «Биоконс» и его влияние на физиологический статус радужной форели, на состояние печени, жабр и мышц рыб. Из результатов сравнительного анализа тканей мышц следует, что реакции мышц – как у контрольной группы рыб, так и у экспериментальной – имеют целый спектр схожих деструкций. Применение продукционного корма, разработанного в Казахстане, – как с пробиотиком «Биоконс», так и без него – не оказывает токсического влияния на структуры печени, т. е. корма безопасны для выращиваемых рыб. Цель работы – экспериментально обосновать эффективность применения пробиотического препарата «Биоконс» в качестве добавки в корма. Задачами исследования были экспериментальное выращивание молоди радужной форели с применением различных кормов, в том числе с добавлением препарата «Биоконс»; проведение сравнительного анализа результатов выращивания молоди форели с применением различных кормов по рыбоводно-био-логическим параметрам; установление влияния применения различных кормов на физиологическое состояние молоди радужной форели, ее печени, мышц и жабр. На основании сравнительного анализа оценки влияния трех видов экспериментальных стартовых и продукционных искусственных кормов (корм без пробиотика, корм с включением препарата пробиотического действия «Биоконс» производства Казахстана и корм импортного производства «Aller Aqua» (Дания)) на рыбоводно-биологические показатели молоди и сеголеток форели было установлено, что при использовании всех вышеперечисленных кормов были получены хорошие результаты.
аквакультура, радужная форель, пробиотик, стартовые корма, продукционные корма, молодь, сеголетки
В Республике Казахстан экспорт рыбной продукции занимает третье место после экспорта зерновых культур (пшеницы и ячменя). Однако объемы вылова рыбы в водоемах рыбохозяйственного значения имеют свои пределы, ограниченные естественной рыбо-продуктивностью водоемов и способностью промысловых видов рыб к воспроизводству. Эти пределы в настоящее время достигнуты, увеличение промысловой нагрузки и других антропогенных факторов на водоемы не приводит к увеличению объемов добываемых рыбных ресурсов. Перспективным решением в данном случае является развитие товарного рыбоводства в аквакультуре.
Развитие товарного рыбоводства в аквакультуре является одним из путей решения проблемы снабжения населения полноценными продуктами питания, богатыми белками. Казахстан обладает огромным количеством разнообразных экологически чистых водоемов (общая площадь водоемов Казахстана, без учета Каспийского моря, составляет около 5 млн га), на территории которых можно производить экологически чистую рыбную продукцию. На сегодняшний день производство товарной рыбы в аквакультуре в Казахстане находится в стадии частнопредпринимательской деятельности, с отсутствием данных по этой области в научной литературе.
Одним из факторов обеспечения качества производимой рыбной продукции является применение экологически чистых технологий [1]. Многие инфекционные заболевания рыб проявляются клинически и пато-морфологически, что позволяет своевременно их диагностировать. Многие болезни у рыб достаточно хорошо описаны, однако исследования в этом направлении продолжаются [2–4]. В последнее время в специальной литературе появились сообщения о при-обретении патогенной микрофлорой рыб антибиотикоустойчивости [5]. Эти данные побуждают вести исследования по изысканию альтернативных препаратов и методов. В этом контексте интересным представляется использование пробиотиков в аквакультуре [6].
Пробиотик – это общий термин, продукты могут содержать дрожжевые клетки, бактериальные культуры (или и то, и другое), которые стимулируют микроорганизмы, способные модифицировать желудочно-кишечную среду для улучшения состояния здоровья и повышения эффективности корма.
Кроуфорд (1979) определил пробиотики как культуру специфических живых микро-организмов, которая имплантируется животному для обеспечения эффективного формирования кишечных популяций как полезных, так и патогенных организмов [6].
В рамках проведенной ТОО «Казахский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства» и «Казахский научно-исследовательский институт перерабатывающей и пищевой промышленности» в 2015 г. на базе ТОО «Чиликское прудовое хозяйство» НИР на тему «Разработка и внедрение биотехнических приемов выращивания форели при использовании отечественных кормов с включением препаратов пробиотического действия для улучшения условий выращивания и повышения рыбопродуктивности» были проведены исследования по применению кормов отечественного производства с добавлением препарата пробиотического действия «Биоконс» для кормления молоди и сеголеток радужной форели, выращиваемых в бассейнах. Поскольку в разрабатываемые корма вводятся препараты пробиотического действия, имеющие бактериальную природу, возникает необходимость исследования физиологического состояния рыб.
Материалы и методики исследования
Эксперименты проводились в бассейнах с артезианской водой. Для оценки качества артезианской воды, поступающей в рыбоводные емкости, проводили общий гидрохимический анализ по общепринятой методике.
У молоди радужной форели определялись основные рыбоводно-биологические характеристики – длина (L), масса (Q), коэффициент упитанности – согласно методикам, принятым в аквакультуре [2, 6]. В качестве исходных технологических нормативов были приняты нормативно-тех-ническая база и методические указания для бассейновых технологий выращивания форели [3].
Оценка темпа роста молоди радужной форели проводилась по результатам контрольных обловов и окончательного облова.
Гистологические исследования включали микроскопическое исследование клеток и тканей организма и полуколичественное определение гистологических нарушений. Гистологические изменения в отдельных органах-мишенях являются чувствительными биомаркерами ксенобиотических эффектов, обеспечивают лучшую оценку воздействия загрязнения воды, чем какой-либо один биохимический параметр [3].
Биологический материал (жабры, печень, мышечная ткань и пр.) фиксировали 10 %-м нейтральным формалином, заливали в парафин, окрашивали гематоксилин-эозином, Азур-эозином по методу Ван Гизона. Микроскопирование окрашенных препаратов осуществлено с помощью микроскопа «БИОМЕД-6 LED». Микрофотосъемка срезов органов произведена с помощью фотонасадки DCM 510.
Окрашенные образцы размером 5 мкм исследовали с помощью светового микроскопа (Olympus CX41-RF, Япония), изображения записывали с помощью цифровой камеры (Olympus DP22, Япония).
Результаты и их обсуждение
Проведение экспериментов проходило с использованием трех видов комбикормов:
- вариант 1 – стартовый корм производства Республики Казахстан без пробиотика (контроль);
- вариант 2 – стартовый корм производства Республики Казахстан с пробиотиком «Биоконс» (0,5 %);
- вариант 3 – стартовый корм «Aller Aqua» производства Дании.
Продолжительность эксперимента составила 35 суток, плотность посадки рыб – 10 000 шт./м3, начальная масса рыб: вариант 1: 0,13 ± 0,01 г; вариант 2: 0,11 ± 0,01 г; вариант 3: 0,12 ± 0,01 г. Конечная масса рыб на момент завершения эксперимента составила: вариант 1: 1,21 ± 0,26 г; вариант 2: 1,32 ± 0,21 г; вариант 3: 1,28 ± 0,23 г. Абсолютный прирост при этом составил: вариант 1: 1,08 г; вариант 2: 1,21 г; вариант 3: 1,16 г.
При гистологическом исследовании жабр сеголеток радужной форели средним весом 27 г, получавших искусственные продукционные корма, разработанные в Казахстане, без включения препарата пробиотического действия, отмечалось преобладание умеренной гиперплазии респираторного эпителия, местами некроз и десквамации жаберного эпителия (рис. 1).
Рис. 1. Жабры рыб, получавших продукционные корма без пробиотика.
Наблюдается некроз ламелл. Ув. × 10
В жабрах рыб, получавших корм с включением препарата пробиотического действия «Биоконс», в межпластинчатых лакунах или везикулах присутствовали одноклеточные паразиты, вызывающие слияние жаберных лепестков (рис. 2).
Рис. 2. Жабры рыб, получавших продукционные корма с пробиотиком.
Гиперплазия и искривление ламелл. Ув. × 20
Также на гистологических препаратах жаберных ламелл рыб, получавших оба вида корма, можно увидеть поражения, вызванные простейшими (рис. 3).
Рис. 3. Протозойная инвазия. Ув. × 100
В результате исследования жабр рыб из контрольной группы установлено, что наряду с нормально функционирующими филаментами и ламеллами присутствовала умеренная гиперплазия и слипание отдельных жаберных ламелл. В жабрах молоди радужной форели средней массой 5 г, получавшей искусственные стартовые корма, разработанные в Казахстане, без включения препарата пробиотического действия, местами наблюдались типичные патологические реакции в виде регрессивных изменений, некроза жабр. У молоди радужной форели, получавшей корм с включением препарата пробиотического действия «Биоконс», также отмечались изменения, но в большинстве своем это были компенсаторно-приспособительные реакции: гипертрофии, гиперплазии и изменение кровообращения и повышение сосудистой проницаемости в сочетании с пролиферацией клеток в местах повреждения органа.
Сравнительный анализ тканей мышц показал, что реакции мышц как у контрольных особей форели, так и у экспериментальных имеет целый спектр схожих деструкций. На продольных срезах мышечных волокон особей форели из контрольной группы видно, что деструктивные изменения захватывают в основном белые и в меньшей степени красные волокна.
В мышцах у группы рыб, получавших стартовый корм без включения препарата пробиотического действия, деструктивные изменения в большей степени проявлялись в виде накопления подкожного жира, истончения мышечных волокон, приводящего к появлению свободных пространств между ними, изогнутость волокон. В мускулатуре форели, получавшей стартовый корм с включением препарата пробиотического действия «Биоконс», волокна красных мышц располагались более плотно, чем волокна белых мышц, но толщина волокон была также неоднородна, и местами встречались цисты с простейшими. В красных мышцах и белых мышцах форели, получавшей корм «Aller Aqua» (Дания), волокна располагались более плотно.
У исследованных сеголеток радужной форели, получавших продукционный корм без пробиотика, в скелетной мускулатуре отмечались наличие некроза, местами отсутствие саркоплазмы и ядер миоцитов, потери поперечной исчерченности мышц. Исследование мышц сеголеток радужной форели, получавшей корм с пробиотиком, выявило их поражения в виде лизиса миофибрилл, нарушения целостности эндомизия, где располагаются капилляры. Исследование мышц сеголеток радужной форели, получавших корм «Aller Aqua», выявило наличие более крупных и плотно уложенных мышечных волокон.
Выявленные повреждения жабр являются неспецифичными для алиментарного токсикоза изменениями, они встречаются при многих других заболеваниях и отражают физиологическое состояние молоди.
Наилучшее значение кормового коэффициента выявлено у корма с пробиотиками, оно составляет 1,02 ед. Значение этого показателя отличается от аналогичного значения импортного корма незначительно, и ниже лишь на 0,04 ед. (3,92 %), а по сравнению с контролем (кормом без включения препарата «Биоконс») – на 0,12 ед. (11,76 %), что является более существенным отличием. По полученным данным можно сделать заключение, что при сравнении трех стартовых кормов корма с пробиотиком показали наилучший результат. После кормления форели стартовыми кормами с пробиотиком «Биоконс» было выявлено увеличение альбумина, повышение концентрации триглицеридов и щелочной фосфатазы в мышцах и печени растущей рыбы, что отражает формирование тенденции к росту и запасам белковой массы, жировых отложений и рост активности кальциево-фосфорного обмена в костях рыб больше, чем при использовании импортного корма.
Заключение
Проведено экспериментальное выращивание молоди и сеголеток радужной форели в бассейнах с применением искусственных стартовых и продукционных кормов, содержащих препарат пробиотического действия «Биоконс». Проведены исследования физиологического состояния сеголеток радужной форели, потреблявших корма, произведенные в Казахстане, с включением препарата пробиотического действия и без него, а также корма импортного производства («Aller Aqua», Дания), в сравнительном аспекте.
Из анализа полученных данных следует, что применение нового продукционного корма –как с добавлением пробиотика «Биоконс», так и без него – безопасно для форели. После кормления форели стартовыми кормами с пробиотиком «Биоконс» было выявлено увеличение альбумина, повышение концентрации триглицеридов и щелочной фосфатазы в мышцах и печени растущей рыбы, что отражает формирование тенденции к росту и запасам белковой массы, жировых отложений и рост активности кальциево-фосфорного обмена в костях рыб больше, чем при использовании импортного корма.
Присутствие в кормах препарата пробиотического действия положительно отразилось на жизнеспособности молоди радужной форели и темпе ее роста.
Теоретически обоснована и экспериментально подтверждена целесообразность включения в состав комбикорма для радужной форели препарата пробиотического действия «Биоконс».
1. Бельчич Е. В. Гистоструктура печени производителей волжской севрюги // Вестн. Астрахан. гос. техн. ун-та. 2007. № 1 (36). С. 184-186.
2. Цуладзе В. Л. Бассейновый метод выращивания лососевых рыб: на примере радужной форели. М.: Агропромиздат, 1990. 156 с.
3. Карпанин Л. П., Иванов А. П. Рыбоводство. М.: Пищ. пром-сть, 1997. 363 с.
4. Ромейс Б. Фиксация гистологических препаратов. М.: Микроскоп. техника, 1953. С. 48-79.
5. А. с. СССР № 107446. Способ подращивания молоди рыб в садках / Сарсембаев Ж. Х., Чулков А. В., Новожилова М. И., Мукашев Н. З., Гаврилова Н. Н.; 1984.
6. Тамаш Г., Хорват Л., Тельг И. Выращивание рыбопосадочного материала в рыбоводных хозяй-ствах Венгрии. М.: Агропромиздат, 1985. 128 с.
