Аннотация и ключевые слова
Аннотация (русский):
Эксперименты по оценке влияния комплексной добавки на основе муки из ракообразных на физиологическое состояние молоди осетровых рыб проводили в лабораториях Астраханского государственного технического университета. Кормление проводили стартовым и продукционным комбикормами рецептов ОСТ и ОТ. В связи с высоким содержанием протеина в крабовой муке проводили замену 10 % рыбной муки на комплексную добавку. Опыты проводили в бассейнах с управляемым температурным режимом. Из оценки результатов выращивания следует, что в опытном варианте масса сеголеток русского осетра была более высокой, чем в контроле, применение профилактической добавки способствовало правильному росту осевого скелета. Особей с признаками сколиотической болезни в опытном варианте было меньше, тогда как в контроле этот показатель был достаточно высоким. При оценке физиологического состояния было выявлено положительное влияние комплексной добавки на показатели крови выращенных сеголеток русского осетра. Следует отметить, что в целом физиологические показатели у рыб были в пределах нормы, однако в контрольном варианте наблюдались признаки анемии, гемоглобин отмечался по нижней границе нормы, в то время как у рыб, потреблявших профилактический комбикорм, этот показатель был несколько выше. При биохимическом анализе было установлено более высокое содержание белка в теле рыб, выращенных на комбикорме с комплексной добавкой. Отличалось количество жира в тканях сеголеток русского осетра: у особей, получавших корм с профилактической добавкой, оно было на уровне 14,1, в то время как у особей в контрольном варианте этот показатель был несколько выше - 16,7. Печень рыб, получавших корм с комплексной добавкой, по морфологическим показателям отвечала норме и имела гомогенно-зернистую консистенцию, без признаков накопления жира в цитоплазме гепатоцитов. Печень рыб контрольного варианта имела рыхлую консистенцию и мозаичную окраску, отличалась ярко выраженной жировой дистрофией. Таким образом, биологически активная добавка оказала положительное влияние на рост и развитие ранней молоди русского осетра.

Ключевые слова:
русский осетр, крабовая мука, витамины, профилактический комбикорм, комплексная добавка на основе муки из ракообразных, сколиоз, рыбоводно-биологические показатели, физиологические показатели
Текст
Текст произведения (PDF): Читать Скачать

Основой обмена веществ и жизненных функций всех живых организмов является питание. Трансформируясь в пищеварительном тракте, поступающее в организм вещество обеспечивает энергией все жизненные функции. Первое место в процессе обмена веществ занимает протеин, который образует самую большую часть органического вещества рыбы. Углеводы встречаются в основном в связанном с протеинами и липидами виде и представлены сложными полимерами. Самыми распространенными углеводными полимерами являются такие комплексы, как гликоген, хитин, гликозаминогликаны, гликопротеины, гликолипиды. Как правило, в теле ракообразных углеводы содержатся в количестве 15-30 % от сухого вещества и представлены в основном хитином. Это один из самых распространенных природных биополимеров, относящийся к полисахаридам. Хитин входит в состав опорных тканей и внешнего скелета ракообразных [1]. Наиболее распространенным продуктом переработки ракообразных является крабовая мука. Установлено, что ее питательные и физико-механические свойства определяются повышенным содержанием белка, золы и хитина в панцире крабов. Искривление осевого скелета у осетровых рыб наблюдается, как правило, у молоди и сеголеток, выращиваемых на рыбоводных предприятиях, особенно часто сколиоз встречается на тепловодных хозяйствах. Развитие патологий позвоночника у молоди может быть связано с недостаточным поступлением с кормом элементов, участвующих в синтезе гликозаминогликанов, которые входят в состав межклеточного вещества костной и хрящевой ткани. Сокращение синтеза гликозаминогликанов в хрящевой ткани приводит к повышению деформации межпозвонковых дисков [2]. Предшественниками гликозаминогликанов и гиалуроновой кислоты являются производные глюкуроновой кислоты и N-ацетилглюкозамина. Последний входит в состав панцирьобразующего вещества - хитина. Ранее в работе [3] было определено, что включение 10 % крабовой муки в качестве замены рыбной в составе стартовых и продукционных комбикормов для осетровых рыб позволяет увеличить прирост массы выращиваемых рыб на 5-6 %, выживаемость - до 81 % при снижении кормовых затрат [3]. Присутствие в составе муки панцирьобразующих веществ - хитина и хитозана, а также каротиноида - астаксантина - способствует синтезу гликозаминогликанов и помогает восстановлению костной и хрящевой ткани [4]. Таким образом, мука из ракообразных может быть источником важнейших биологически активных веществ, необходимых для нормального функционирования обменных процессов в межклеточном веществе хрящевой ткани рыб. Прогрессирование сколиотической болезни также может быть связано с недостаточным поступлением в организм аскорбиновой кислоты. Витамин D принимает участие в процессах хондро- и остеогенеза, управляет процессом роста костной ткани, играет важную роль в минеральном обмене, способствуя всасыванию кальция и фосфора из кишечника и активизируя его перенос из крови в костную ткань. На формирование активных форм витамина D влияет токоферол. При его нехватке нарушаются процессы формирования костной ткани [5]. Следует отметить, что практически все компоненты рыбных кормов содержат витамины. Однако в процессе производства часть их разрушается. В связи с этим необходимо дополнительно обогащать производимые комбикорма витаминами, для этого в настоящее время применяют стабилизированные формы ряда витаминов (D, Е, С и др.) [6]. Таким образом, следует отметить, что совместное применение хитинсодержащего компонента и витаминов позволяет предотвратить искривление позвоночника у молоди осетровых рыб, часто возникающее при индустриальном выращивании. В связи с этим необходимо было оценить эффективность влияния комплексной добавки на основе муки из ракообразных на рост и развитие молоди осетровых рыб. Методика исследований Исследования по оценке влияния комплексной добавки на основе муки из ракообразных на физиологическое состояние молоди осетровых рыб проводили в лабораториях Астраханского государственного технического университета. Подращивание личинок, перешедших на активное питание, проводили в аквариумах емкостью 400 л с замкнутым циклом водоснабжения, плотность посадки составляла 2 тыс. шт. на м3. Молодь выращивали в лотках ЛПЛ с прямым током воды емкостью 2,1 м3. Плотность посадки рыб определяли в соответствии с массой и температурой воды. Ремонтную группу рыб содержали в бассейнах с круговым током воды объемом 9 м3 в установке замкнутого водоснабжения. Кормление проводили стартовым и продукционным комбикормами рецептов ОСТ и ОТ [7]. Раннюю молодь кормили 12 раз в сутки, в светлое время. По мере роста рыб периодичность кормления сокращали сначала до 6, а затем до 3 раз. Взвешивание и измерение рыб и внутренних органов, а также определение коэффициента упитанности выполняли согласно рекомендациям [8]. Среднесуточный прирост рассчитывали по формуле Г. Г. Винберга [9]. Для оценки физиологического состояния рыб использовали гематологические и физиолого-биохимические показатели. У молоди кровь брали методом отсечения хвостового стебля. Концентрацию гемоглобина в крови определяли фотометрически цианметгемоглобиновым методом с помощью фотоэлектроколориметра КФК-3. Концентрацию общего сывороточного белка в плазме крови устанавливали рефрактометрическим методом с применением рефрактометра ИРФ 454Б2М. Общий химический состав тканей рыб определяли общепринятыми методами: содержание влаги - высушиванием при постоянной температуре 105 °С; жира - экстракционным методом в аппарате Сокслета; концентрацию протеина - по Кьельдалю с использованием реактива Несслера; определение минеральных элементов - озолением при температуре 550 °С [10]. На основании известных потребностей осетровых рыб в витамине D, аскорбиновой кислоте и токофероле была составлена профилактическая добавка на основе муки из панциря краба. В ее составе использовали стойкую к разрушению фосфатную форму аскорбиновой кислоты, микрогранулированную форму витамина Е и стабилизированный порошок холекальциферола. Экспериментальную часть работ проводили в двойной повторности. Все полученные результаты подвергались статистической обработке с использованием персонального компьютера и программы Microsoft Exel. При этом определяли объем выборки, среднее арифметическое (M), статистическую ошибку (m), коэффициент вариации (Cv), критерий достоверности Стьюдента [11]. Результаты и их обсуждение На основе известных потребностей осетровых рыб в витаминах D, Е и аскорбиновой кислоте была сформирована комплексная добавка на основе муки из панциря ракообразных. В связи с высоким содержанием белка в муке из ракообразных провели замену 10 % рыбной муки на комплексную добавку. В первый месяц эксперимента выращивание рыб осуществляли при оптимальной температуре воды (на уровне 22-23 °С), кормление осуществляли комбикормом с комплексной добавкой. Признаки искривления позвоночника у исследуемых рыб как в опытном, так и в контрольном варианте не наблюдались. Оценка рыбоводно-биологических показателей выращиваемых рыб показала, что среднесуточный прирост рыб, потреблявших комбикорм с добавкой, был на 6 % выше, чем в контрольном варианте, выживаемость молоди также была достаточно высокой при использовании комбикорма с комплексной профилактической добавкой (табл. 1). Таблица 1 Рыбоводно-биологические показатели молоди русского осетра, выращенной на комбикорме с комплексной добавкой Показатель Вариант контроль опыт Масса начальная, г 11,5 ± 0,78 12,4 ± 0,81 Масса конечная, г 37,3 ± 0,75 41,1 ± 0,85* Длина начальная, см 11,7 ± 2,56 11,8 ± 2,35 Длина конечная, см 14,2 ± 3,12 17,2 ± 2,45** Среднесуточный прирост, г 0,43 0,48 Выживаемость, % 90,0 98,0 Кормовой коэффициент 1,1 1,1 Период опыта, сут 60 60 *Различия достоверны при * p ≤ 0,01; ** p ≤ 0,05. Через 30 суток температуру воды постепенно повысили до 25 °С, далее устанавливали постоянную температуру 28 °С, после чего было отмечено, что в контрольном варианте стали появляться экземпляры с признаками искривления позвоночника, в то время как в опытном, где рыбы потребляли профилактический комбикорм, такое явление отсутствовало. Оценка результатов выращивания в опытном варианте выявила, что масса сеголеток русского осетра была выше, чем в контроле, и достигала примерно 41 г. Кроме того, применение профилактической добавки способствовало правильному росту осевого скелета. Количество особей с признаками сколиотической болезни в опытном варианте было меньше и составляло 7 %, тогда как в контроле этот показатель был достаточно высоким - 21 %. Следует отметить, что в конце эксперимента различалась также и длина рыб. Рыбы в опытном варианте были более прогонистыми, чем в контроле, т. к. в контрольной группе у некоторых особей наблюдалась деформация позвоночника. Это свидетельствует о том, что рост позвоночного столба у рыб контрольного варианта снизился и не успевал за приростом массы, что привело к искривлению. Вместе с тем высокая температура воды усилила потребность рыб в витаминах А, Е и С (аскорбиновой кислоте), т. к. в результате теплового влияния на организм рыбы расход этих веществ в организме повышается. У рыб, потреблявших профилактический комбикорм, недостаток этих витаминов не отмечался. Наряду с этим астаксантин, содержащийся в крабовой муке, защищает клетки от повреждения и снижает действие теплового стресса. В связи с тем, что потребление полноценных комбикормов положительно влияет на показатели крови молоди рыб, которые отражают общее физиологическое состояние, необходимо было изучить эти показатели. При оценке физиологического состояния было выявлено положительное влияние комплексной добавки на основе муки из ракообразных на показатели крови сеголеток русского осетра. Следует отметить, что физиологические показатели у рыб были в пределах нормы, однако в контрольном варианте наблюдались признаки анемии. Содержание гемоглобина фиксировалось по нижней границе нормы - 48,2 г/л, в то время как у рыб, потреблявших профилактический комбикорм, этот показатель был несколько выше и составлял 55,7 г/л. Концентрация общего сывороточного белка во всех вариантах опыта соответствовала оптимальным значениям [7], однако в опытном варианте этот показатель был несколько выше (36,4 г/л). Поскольку общий белок в крови служит для определения рациональности питания, следует отметить положительное влияние комбикорма с комплексной добавкой и на этот показатель физиологического состояния рыб. Физиологическое состояние оценивали по общему химическому составу тела сеголеток русского осетра, выращенных на комбикормах с добавлением комплексной добавки. В результате этих исследований было установлено, что молодь русского осетра, выращенная на опытном комбикорме, по химическому составу тела отличалась от контрольной группы главным образом более высоким содержанием белка - 69,0 % (табл. 2). Таблица 2 Биохимический состав тела сеголеток русского осетра, выращенных на комбикорме с комплексной добавкой, % в сухом веществе Биохимический состав Опыт (комбикорм + комплексная добавка) Контроль (комбикорм) Сухое вещество 17,7 ± 0,90 14,3 ± 0,59 Белок 69,0 ± 2,94* 63,8 ± 3,63 Жир 14,1 ± 0,59 16,7 ± 0,45 БЭВ 5,8 ± 0,42 5,4 ± 0,32 Минеральные вещества 10,6 ± 1,05* 11,5 ± 0,61 *Различия достоверны при * p < 0,05. Содержание жира в тканях рыб также различалось. Количество жира в тканях сеголеток русского осетра, получавших корм с комплексной добавкой, было на уровне 14,1, в то время как у особей в контрольном варианте этот показатель был несколько выше - 16,7. По всей видимости, наличие в составе комплексной добавки витаминов, нормализующих жировой обмен, а также крабовой муки, обладающей адгезионными свойствами за счет содержания хитина и хитозана, стимулировало обменные процессы в условиях теплового стресса. Способность хитинобразующих веществ связывать продукты перекисного окисления липидов, холестерин, жирные и желчные кислоты [12] предотвратила нарушение жирового обмена. Печень рыб является многофункциональным органом, осуществляющим ряд жизненно важных функций. Она принимает участие в углеводном, жировом, белковом и витаминном обмене. Печень рыб быстрее других органов реагирует на ухудшение условий окружающей среды. В связи с этим для оценки физиологического состояния сеголеток русского осетра также необходимо было провести гистологический анализ печени. В результате проведенных исследований было установлено, что печень рыб, поедавших профилактический комбикорм, по морфологическим показателям отвечала норме. Положительное воздействие на жировой обмен доказал и гистологический анализ: в клетках были хорошо различимы ядра, в основном крупные, имеющие незначительные различия в размере и форме (рис. 1). Рис. 1. Печень сеголеток русского осетра, потреблявших комбикорм с комплексной добавкой на основе муки из ракообразных (окраска гематоксилин-эозином. Ув. 22 × 40) В цитоплазме гепатоцитов не отмечено признаков накопления жира, по консистенции гомогенно-зернистая. На срезе отмечается достаточное количество купферовых клеток. Печень рыб контрольного варианта имела рыхлую консистенцию и мозаичную окраску. В ходе гистологических исследований была выявлена ярко выраженная жировая дистрофия, которая характеризуется накоплением в цитоплазме гепатоцитов мелких капель жира, сливающихся затем в более крупные или в одну жировую вакуоль, которая занимает всю цитоплазму и смещает или сглаживает ядро (рис. 2). Рис. 2. Печень сеголеток русского осетра контрольного варианта, с большим количеством жировых пустот (окраска гематоксилин-эозином. Ув. 22 × 40) У большинства гепатоцитов ядра отсутствуют полностью. Заключение В заключение следует отметить, что результаты комплексной оценки всех установленных рыбоводно-биологических и физиологических показателей подтвердили достаточно высокую эффективность применения комплексной добавки на основе муки из ракообразных, обогащенной аскорбиновой кислотой, витамином D и Е, в комбикормах для осетровых рыб. Кроме того, применение комплексной добавки снизило число рыб с признаками сколиотической болезни и повысило их устойчивость к воздействию экстремально высоких температур. Таким образом, комплексная профилактическая добавка оказала положительное влияние на рост и развитие ранней молоди русского осетра.
Список литературы

1. Остроумова И. Н. Биологические основы кормления рыб. СПб.: Изд-во ГосНИОРХ, 2001. 372 с.

2. Путилова А. А., Лихварь А. Т. Сколиозная болезнь. Киев: Здоровье, 1975. 160 с.

3. Бахарева А. А., Харламова Ю. В. Возможность использования продуктов глубокой переработки ракообразных в составе комбикормов для осетровых рыб // Вестн. Астрахан. гос. техн. ун-та. Сер.: Рыбное хозяйство. 2004. № 2 (21). С. 95-101.

4. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1998. 704 с.

5. Кабак С. Л., Фещенко С. П., Аниськова Е. П. Костно-суставная система. Морфологические и биохимические аспекты формирования. Минск: Навука i тэхнiка, 1990. 181 с.

6. Раденко В. Н. Использование стойких к разрушению заменителей аскорбиновой кислоты в комбикормах для рыб // Инф. пакет. Сер.: Аквакультура. Корма и кормление. 1997. Вып. 2. С. 1-14.

7. Пономарев С. В., Гамыгин Е. А., Никоноров С. И., Пономарева Е. Н., Грозеску Ю. Н., Бахарева А. А. Технологии выращивания и кормления объектов аквакультуры юга России. Астрахань: Нова плюс, 2002. 264 с.

8. Правдин П. Ф. Руководство по изучению рыб. М.: Пищ. пром-сть, 1966. 250 с.

9. Винберг Г. Г. Интенсивность обмена и пищевые потребности рыб. Минск: Изд-во Белорус. ун-та, 1956. 251 с.

10. Щербина М. А. Методические указания по физиологической оценке питательной ценности кормов для рыб. М.: Изд-во ВНИИПРХ, 1983. 83 с.

11. Лакин Г. Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. 293 с.

12. Гальбрайх Л. С. Хитин и хитозан: строение, свойства, применение // Соросовский образовательный журнал. 2001. Т. 7. № 1. С. 51-56.